CloneJET™ PCR Cloning Kit

Zaawansowany system pozytywnej selekcji do wysoce wydajnego klonowania produktów PCR wygenerowanych przez każdą polimerazę.Wektor do pozytywnej selekcji pJET1.2/blunt posiada letalny gen blokowany przez wprowadzany insert dzięki czemu tylko plazmidy zrekombinowane są dalej propagowane. Dla wygody przy mapowaniu i innych manipulacjach insertem wektor pJET1.2/blunt posiada miejsce wielokrotnego klonowania ograniczone z dwóch stron miejscami cięć dla BglII. Dodatkowo wektor posiada promotor T7 do transkrypcji insertu in vitro.

Właściwości:

• Szybki - klonowanie produktów PCR w 5 min.
• Najwyższa wydajność - więcej niż 99% pozytywnie wklonowanych insertów.
• Brak tła - wektor pozytywnej selekcji.
• Uniwersalny - odpowiedni do klonowania zarówno lepkich jak i tępych końców fragmentów DNA z/ bez fosforanów 5'.
• Ekonomiczny - nie wymaga późniejszej selekcji kolonii.
• Dogodny wektor pJET1.2:
   - gotowy do użycia: zlinearyzowany, tępo zakończony, zawiera  - grupy fosforylowe 5',
   - MCS zaprojektowane do łatwego mapowania i klonowania,
   - promotor T7 do transkrypcji insertu in vitro,
   - dwa miejsca cięcia dla enzymu BglII ograniczające MCS.

Zastosowanie:

• Klonowanie tępych końców produktów PCR wygenerowanych przez Pfu lub inne proofreading polimerazy DNA.
• Klonowanie produktów PCR z końcami 3'-dA.
• Klonowanie fragmentów DNA wygenerowanych przez cięcie enzymami restrykcyjnymi.
• Sekwencjonowanie klonowanych fragmentów DNA.
• Transkrypcja in vitro klonowanych fragmentów.

Uwaga:

Przed elektroporacją zawsze oczyszczaj mieszaninę ligacyjną na kolumienkach lub ekstrahuj chloroformem. Elektroporacja jest inhibowana przez obecność soli i białek.

Skład zestawu:

• pJET1/blunt Cloning Vector
• T4 DNA Ligase
• 2X Reaction Buffer
• DNA Blunting Enzyme
• pJE1.2 Forward Sequencing Primer
  pJE1.2 Reverse Sequencing Primer
• Control PCR Product
• Water, nuclease-free
• Protocol