Phusion® High-Fidelity PCR Kit

• Wysoka dokładność i precyzja - wykazuje najwyższy poziom wierności kopiowania wśród wszystkich dostępnych termostabilnych polimeraz na rynku.
• Wysoka procesywność - duża szybkość amplifikacji (15-30s/kb) spowodowana wysoką efektywnością działania enzymu.
• Wysoka powtarzalność kopiowania matrycy.
• Najniższy współczynnik błędu oraz zwiększona efektywność włączania nukleotydów do matrycy, dzięki wprowadzeniu dodatkowej domeny wiążącej dsDNA.
• Wysoka wydajność amplifikacji.
• Stabilność - wysoka odporność na działanie czynników zewnętrznych i inhibitorów reakcji PCR, wymaga niewielkiej optymalizacji reakcji.

Opis:

Wchodząca w skład zestawu polimeraza  Phusion® DNA Polymerase oferuje najwyższą jakość wyników PCR. Enzym amplifikuje matryce z niespotykaną szybkośćią i dokładnością, nawet w przypadku trudnych matryc, np. wysyconych parami GC lub mających tendencje do tworzenia struktur drugorzędowych. Unikalna struktura enzymu, osiągnięta dzięki wprowadzeniu dodatkowej domeny wiążącej dwuniciowe DNA, skutkuje wzrostem efektywności tworzenia kompleksów enzym-dsDNA, a w konsekwencji wzrostem szybkości wstawiania nukleotydów. Współczynnik błędu dla polimerazy Phusion® jest najniższy spośród wszystkich termostabilnych polimeraz dostępnych na rynku. Dla polimerazy Phusion® jest on odpowiednio 50-krotnie niższy niż dla Thermus aquaticus, 6-krotnie niższy niż dla Pyrococcus furiosus. Natomiast wskaźnik procesywności jest 10-krotnie wyższy niż dla Pyrococcus furiosus.

Zastosowanie:

• PCR typu high-fidelity PCR. Polimeraza Phusion® DNA wykazuje najniższy współczynnik błędu, który kształtuje się na poziomie 4.4 x 10^-7. Sprawia to, iż polimeraza Phusion ®High-Fidelity DNA jest doskonałym narzędziem do reakcji PCR, wymagających najwyższej dokładności.
• Klonowanie. Polimeraza Phusion® DNA amplifikuje nawet trudne matryce z najwyższą wiernością i szybkością, dlatego idealnie nadaje się do klonowania.W wyniku aktywności polimerazy Phusion® powstają tępe końce.
• Amplifikacja długich fragmentów DNA. Proces wydłużania jest znacząco skrócony dzięki niezwykle wysokiej szybkości i efektywności enzymu.
• DHPLC oraz Microarray applications. Bufory reakcyjne są dostępne również w wersji wolnej od detergentów, co jest szczególnie istotne w przypadku techniki DHPLC.

Skład zestawu:

• Polimeraza Phusion® DNA 200U (2u/µl)
• 5x Phusion®HF Buffer (3 x 1.5 ml)- zapewnia optymalną wierność kopiowania,
• 5x Phusion®GC Buffer (1 x 1.5 ml),
• dNTPs - 400 µl (10 mM/każdy),
• Matryca kontrolna lambda 40 µl (0.5 ng/µl),
• 1.3 kb startery - 50 µl (4/µM), 
• 10 kb startery - 50 µl (4/µM),
• DNA stndardowej wielkości DNA (#F-303SD) 400 µl
• DMSO (500 µl)- do amplifikacji trudnych i długich matryc, wysyconych GC,
• 50 mM MgCl ₂ -solution (1.5 ml).

 Porównanie polimeraz (PDF)