Produkty
Producenci

T4 DNA Ligase

nr kat.: EL0011
Opakowanie: 1000 U
Cena brutto: do wyceny
ilość szt.

towar niedostępny

dodaj do przechowalni

Opis

Stężenie 5 u/µl        

Ligaza T4 DNA katalizuje tworzenie wiązań fosfodiestrowych pomiędzy zestawionymi końcami 5’forsforanowymi i 3’-hydroksylowymi w dupleksach DNA lub RNA. Enzym naprawia pojedyncze nacięcia w dupleksach DNA, RNA lub hybrydach RNA/DNA poprzez łączenie spójnych lub tępych końców DNA. Nie posiada jednak aktywności na jednoniciowych kwasach nukleinowych.Ligaza T4 DNA wymaga ATP jako kofaktora.  

 

  • Szybka – ligacja lepkich końców w 10 min.
  • 100% aktywności w buforach do enzymów restrykcyjnych, PCR oraz RT , 
  • Dostarczana wraz z buforem reakcyjnym zawierającym ATP oraz 50% PEG dla wydajnej ligacji tępych końców.

 

Inhibitory

Ligaza T4 DNA jest silnie inhibowana przez NaCl lub KCl jeżeli stężenie przekracza 200 mM.

Inaktywacja

Inaktywacja w temperaturze 65°C przez 10 min. lub w 70°C przez 5 min.

 

Uwagi:

  • Przyłączenie ligazy do DNA może spowodować przesunięcie prążków podczas elektroforezy. Aby tego uniknąć inkubuj próbki z 6X DNA Loading Dye & SDS Solution (#R1151) przez 65°C przez 10 min. lub w 70°C przez 5 min., a następnie schłodź na lodzie przed elektroforezą. 
  • Objętość mieszaniny reakcyjnej podczas procedury transformacji nie powinna przekraczać 10% objętości komórek kompetentnych.
  • Przed elektroporacją usuń ligazę z mieszaniny reakcyjnej za pomocą kolumienek oczyszczających lub ekstrahuj chloroformem, a następnie precypituj etanolem.

 

Bufor do przechowywania:

20 mM Tris-HCl (pH 7.4); 1 mM DTT;50mM KCl; 0.1mM EDTA i 50% glicerol.

Bufor reakcyjny (#B69)

400 mM Tris-HCl, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP (pH 7.8 w 25°C)

Źródło:

Komórki E.coli z wklonowanym genem 30  bakteriofaga T4

Dane techniczne

Opakowanie 1000 U

Produkty powiązane

do góry
Sklep jest w trybie podglądu
Pokaż pełną wersję strony
Sklep internetowy Shoper.pl