FastGene® Optima HotStart ReadyMix

Wystarcza na 500 x 25 µL reakcji

Wysoce wytrzymała

FastGene® Optima zapewnia amplifikację fragmentów o długości nawet 10 kpz. FastGene® Optima jest mieszaniną wysoce oczyszczonej polimerazy Taq oraz zmodyfikowanej polimerazy typu-B z aktywnością proof-reading. Współczynnik błędu jest około 10-15 razy niższy w porównaniu ze standardową TAQ

Optima HotStart ReadyMix
FastGene® Optima HotStart ReadyMix łączy w sobie wyjątkową wydajność oraz wytrzymałość z unikalnym przeciwciałem inhibującym wstępną, niespecyficzną reakcję. Przeciwciało zostaje usunięte podczas pierwszej, wstępnej aktywacji.  

Gotowa do użycia 
Mastermix dodatkowo zawiera kolorowy obciążnik dzięki czemu produkty PCR można od razu nanieść na żel.

Optymalna do złożonych próbek 
Połączenie wysokiej wydajności, wierności oraz wytrzymałości zapewnia skuteczną amplifikację DNA nawet z tak złożonych matryc jak tych pochodzących z wątroby.

Porównanie działania konkurencyjnej polimerazy (A) oraz (B) FastGene® Optima na na DNA z wątroby rekinka (rodz. Scyliorhinidae). Produkt PCR jest wielkości 1030 pz i został rozdzielony na 1.2% żelu agarozowym. FastGene® Optima tworzy znacznie mniej kompleksów primer-dimer oraz posiada wyższą wydajność.

Wysoka wydajność z matrycami bogatymi w zasady GC.
Większość polimeraz wykazuje się niską wydajnością w przypadku matryc bogatych w GC.  
 

 

Porównanie działania konkurencyjnej polimerazy oraz FastGene® Optima w amplifikacji matrycy bogatej w GC-Rich. Zamplifikowano dwa fragmenty z 60.7% i 64.3% zawartością GC oraz o wielkości 1839 pz i 1260 pz. Dane dostarczone dzięki uprzejmości Ms. Ryoko Nakayama, Department of Pathology, Tsurumi University, Japonia.

Optyma(l)na do SNP
Detekcja SNP (single nucleotide polymorphism) wymaga wyjątkowej wierności amplifikacji.

Typowanie SNP genu ALDH przy użyciu FastGene® Optima. Gen ALDH sklasyfikowany jako gen podatności na alkohol został przeanalizowany na obecność SNP poprzez trawienie  zamplifikowanych homo- i heterozygot za pomocą MboII.
Dr. Che Xiano-Fang, Department of Biochemistry, Tokyo Medical University, Japonia.
 

Zastosowanie:

• Standard PCR 
• Hot-Start
• RT-PCR
• Bardzo złożone matryce
• Matryce bogate w zasady GC
• SNP-typing
• Multiplex PCR

Referencje użytkowników:
1. Direct PCR from E. coli colonies
"With the FastGene® Optima HotStart ReadyMix with Dye we could clearly distinguish between samples with inserts (800 bp) and those without inserts (300 bp)"
 
Direct PCR from Eschrichia coli colonies using FastGene® Taq Optima HotStart ReadyMix or Competitor T. The ReadyMixes were used to determine the presence or absence of inserts.The FastGene® Taq Optima HotStart ReadyMix yielded a clearer electrophoresis pattern without smearing and delivered a result for all colonies. The competitor T was not able to amplify 10 colonies.
Data was provided by a customer

2. Genotyping using mouse-tail tissue
"Analysis of the experiment was very easy because it already contains the loading dye, meaning that we could apply the reaction directly onto an agarose gel. Additionally, the PCR efficiency was higher when compared to the competitor‘s ready-mix without loading dye"

Genotyping of using FastGene® Taq Optima HotStart ReadyMix or a competitor. The two ReadyMixes delivered the same genotyping results. The FastGene® Taq Optima HotStart ReadyMix  had a higher efficiency shown by the bigger bands. The FastGene® Taq Optima HotStart ReadyMix is easier to use since it contains the loading dye meaning that the PCR product can be directly added to the gel.

FAQ
What is the error rate of this enzyme?
The error rate is around 10-15 times lower compared to a regular TAQ. The FastGene Optima PCR system is a blend of Taq DNA polymerase and an engineered archaeal (B-family) DNA polymerase. Both enzymes possess 5’ – 3’ polymerase activity, but only Taq possesses 5’ – 3’ exonuclease activity, and only the B-family DNA polymerase possesses 3’ – 5’ exonuclease activity.

Does the PCR products have a 3′ A overhang?
Yes there is a 3′ A overhang.

Can I use Optima for dicret PCR from cell lysates without DNA extraction?
This should work for bacterial cells. For eukaryotic cells, we recommend to use DNAreleasy.