qPCR

qPCR

Technika qPCR pozwala na szybką i czułą analizę materiału genetycznego. Stosuje się ją w badaniach genetycznych, diagnostyce chorób, monitorowaniu ekspresji genów i analizach środowiskowych. Wybierz w sklepie ABO materiały do qPCR o doskonałej, dopracowanej przez specjalistów jakości.

PCR a qPCR

PCR (ang. Polymerase Chain Reaction), czyli łańcuchowa reakcja polimerazy, to technika molekularna stosowana do amplifikacji specyficznych fragmentów DNA. Wynalazł ją Kary Mullis w 1983 roku. Od tego momentu PCR odgrywa ważną rolę w medycynie, biologii molekularnej, kryminalistyce, archeologii i innych naukowych dziedzinach. Technika pozwala na szybkie powielanie nawet tych fragmentów DNA, które występują w niewielkiej ilości.

QPCR natomiast to ulepszony wariant klasycznej techniki PCR. Ta zaawansowana metoda molekularna jest używana do ilościowego pomiaru kwasów nukleinowych, DNA lub RNA, w próbkach biologicznych.
Do podstawowych właściwości qPCR należy możliwość dokładnego określenia ilości początkowego materiału genetycznego w próbce. Dzięki temu można opisać, jak wiele kopii konkretnego genu występuje w próbce, co ma znaczenie dla badania ekspresji genów, analiz diagnostycznych i oceny zmian liczbowych w genomie. Inna ważna właściwość qPCR to wykrywanie i monitorowanie ilości powstających produktów amplifikacji w czasie rzeczywistym, w trakcie każdego cyklu reakcji. Pozwala to na analizę kinetyki reakcji i ocenę ilości docelowego materiału genetycznego w czasie rzeczywistym.

Zalety i wady qPCR

Metoda qPCR (ilościowa reakcja łańcuchowa polimerazy) częściowo różni się od klasycznej reakcji PCR. Jedną z istotnych różnic jest możliwość obserwacji stężenia produktu amplifikacji w czasie rzeczywistym bez przeprowadzania dodatkowych etapów, takich jak hybrydyzacja i elektroforeza. W związku z tym pomiar i odczyt wyniku odbywa się bezpośrednio w termocyklerze, a to zmniejsza ryzyko kontaminacji próbki. Dzięki krótszemu czasowi reakcji i uproszczonej procedurze qPCR zyskało popularność w badaniach nad DNA i RNA. Ze względu na wysoki poziom czułości detekcji nawet niewielkich ilości kwasów nukleinowych qPCR jest szczególnie użyteczne w diagnostyce zakażeń wirusowych i bakteryjnych.

Pomimo tych zalet technika qPCR cechuje się pewnymi ograniczeniami – wysokim kosztem aparatury, koniecznością odpowiedniego zaprojektowania eksperymentu, doboru właściwych starterów i genu referencyjnego, właściwego przygotowania próbek i analizy danych. Metoda wymaga specjalistycznej wiedzy statystycznej oraz bioinformatycznej.

Zastosowania qPCR

Ilościowa reakcja łańcuchowa polimerazy (qPCR) znajduje szerokie zastosowanie w wielu dziedzinach nauki, przemysłu i medycyny dzięki zdolności dokładnego pomiaru ilości DNA lub RNA w próbkach. Do obszarów, w których wykorzystuje się qPCR, należy:

• Diagnostyka medyczna – qPCR pozwala na szybkie wykrycie patogenów, grypy, HIV, grzybów oraz bakterii, na przykład Chlamydia. Umożliwia też znalezienie mutacji genetycznych związanych z nowotworami i innymi chorobami.

• Badania biologiczne – qPCR używa się do badania poziomów ekspresji genów w odpowiedzi na rozmaite warunki biologiczne oraz do identyfikacji genów regulujących procesy biologiczne. Technikę stosuje się do monitorowania obecności i ilości mikroorganizmów w środowisku, wodzie, glebie i powietrzu.

• Medycyna sądowa i kryminalistyka – metoda qPCR pozwala zidentyfikować osobę na podstawie analizy DNA.

• Biotechnologia – technika qPCR służy do monitorowania jakości produkcji biologicznych oraz kontroli mikroorganizmów w przemyśle farmaceutycznym i spożywczym.

Zastosowania qPCR są, jak widać, niezwykle wszechstronne i odgrywają istotną rolę w wielu dziedzinach nauki, medycyny i przemysłu dzięki szybkości, czułości oraz precyzji pomiarów ilościowych materiału genetycznego.

Zapraszamy do ABO i wyboru produktów wykorzystywanych w technice qPCR pochodzących od uznanych firm takich jak ABP Biosciences, GeneOn, Nippon, NZYTech i Thermo Fisher Scientific.